可替宁单克隆抗体的制备及其在免疫学检测中的应用

作者：雷雅静; 周丽芳; 王安行; 陈枢青^*

来源：浙江大学学报(医学版), 2020, 49(06): 765-771.

DOI：10.3785/j.issn.1008-9292.2020.12.12

• 可替宁
• 单克隆抗体
• 间接竞争酶联免疫吸附测定
• 胶体金免疫层析试纸
• 尿液

目的:研制可替宁单克隆抗体(单抗),并建立检测人体尿液样本中可替宁的免疫检测方法。方法:利用人工合成的可替宁-牛血清白蛋白(COT-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术筛选一种对可替宁具有高特异性和敏感性的单抗,并将该单抗用于建立间接竞争ELISA(ic-ELISA)和胶体金免疫层析试纸,检测人体尿液中可替宁的含量。结果:所研制的可替宁单抗经ic-ELISA鉴定,半数有效抑制浓度为21 ng/mL,经胶体金免疫层析试纸鉴定,截断值为100 ng/mL。所建立的ic-ELISA方法检测限为0.1 ng/mL,回收率为99.41%～117.98%,批间和批内变异系数分别小于等于15.31%和15.07%。所建立的胶体金免疫层析试纸稳定性和重复性检测准确率均为100%。结论:以制备的可替宁单抗为基础开发的ic-ELISA和胶体金免疫层析试纸可快速、可靠地检测人体尿液中可替宁含量,可作为环境烟草烟雾在人体内暴露程度的有效检测方法。

• 单位
  浙江大学