摘要
目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)对肺纤维化小鼠成纤维细胞增殖的影响及其机制。方法选择C57BL/6小鼠30只,随机分为模型组和假手术组各15只。模型组经气管滴入博来霉素建立肺纤维化模型,假手术组经气管滴入等体积生理盐水。造模第28天,采用RT-PCR法检测两组肺组织miR-146a相对表达量。提取并培养造模第28天模型组肺成纤维细胞,随机分为miR-146a过表达组、对照组、空白组,分别给予miR-146a mimics(miR-146a激活剂)、miR-146a阴性对照物及缓冲液转染。转染24 h,再培养36 h,收集细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用Western blotting法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、核因子κB(NF-κB) p65及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)蛋白表达。结果模型组肺组织miR-146a相对表达量明显低于假手术组(P <0. 01)。miR-146a过表达组细胞增殖率为(13. 47±1. 83)%,对照组为(33. 87±1. 32)%,空白组为(32. 57±1. 54)%,miR-146a过表达组低于其他两组(P均<0. 05),而对照组与空白组比较P> 0. 05。与对照组和空白组比较,miR-146a过表达组TGF-β1、IκBα蛋白相对表达量均降低(P <0. 05),NF-κB p65蛋白相对表达量升高(P均<0. 05),而对照组与空白组比较P> 0. 05。结论 miR-146a可抑制肺纤维化小鼠成纤维细胞增殖,其机制可能与阻止细胞内NF-κB核转位有关。
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单位桂林医学院附属医院