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摘要
目的:建立了一种灵敏检测牛奶中大肠杆菌O157:H7的新型荧光酶联免疫吸附方法。方法:以碱性磷酸酶水解焦磷酸盐-Cu2+配位复合物，释放出Cu2+形成铜纳米簇作为信号报告探针，通过对关键因素Cu2+浓度、焦磷酸盐浓度、DNA模板的浓度和长度进行优化。结果:在最优条件下，大肠杆菌O157:H7的菌数为5×104～1×108 CFU/mL时，与荧光信号值有较好的线性关系(R2=0.980 8),最低检出限为2.4×104 CFU/mL。结论:该方法成功地应用于低脂牛奶和脱脂牛奶样本中大肠杆菌O157:H7的测定，平均回收率为92.2%～108.5%,相对标准偏差为4.9%～10.4%。
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