摘要
目的大黄酸对心肌细胞损伤的作用以及可能的作用机制仍不清楚。探讨大黄酸对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的作用及其机制。方法实验分为空白对照组(不作任何处理)、H2O2诱导组(H2O2刺激心肌细胞H9c2造模)、大黄酸干预组(H2O2刺激心肌细胞H9c2造模,1μg/mL大黄酸干预)。荧光探针和生化法检测谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的含量;RT-qPCR和免疫荧光检测H9c2细胞凋亡情况;RT-qPCR检测H9c2细胞炎症水平;Western blot检测MAPK(p38、JNK)和NF-κB信号通路的表达。结果与空白对照组比,H2O2诱导组显著促进ROS的表达(P<0.01),而大黄酸干预组较H2O2诱导组显著降低(P<0.01)。H2O2诱导组GSH-Px和CAT含量(0.147±0.021、0.106±0.021)较空白对照组(1.210±0.016、1.127±0.046)显著减少(P<0.01),而大黄酸干预组(1.360±0.086、1.310±0.099)较H2O2诱导组显著提高(P<0.01)。与空白对照组比,H2O2诱导组显著促进促炎因子IL-6, TNF-α、IL-1β和IL-1αmRNA的表达水平并激活MAPK(p-JNK和p-P38)和NF-κB(p-P65)信号通路(P<0.01),而大黄酸干预组较H2O2诱导组显著降低(P<0.01)。空白对照组、H2O2诱导组、大黄酸干预组Bax表达量分别为0.130±0.009、1.489±0.052、0.437±0.127;Bcl-2表达量分别为0.417±0.062、0.371±0.046、1.532±0.083,Caspase-3表达量分别为0.140±0.021、1.125±0.076、0.390±0.064,Caspase-9表达量分别为0.150±0.008、1.002±0.093、0.430±0.070;以上结果提示,与空白对照组比,H2O2诱导组显著促进Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达,抑制Bcl-2 mRNA的表达(P<0.01),而大黄酸干预组较H2O2诱导组显著降低Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达,促进Bcl-2 mRNA的表达(P<0.01)。结论大黄酸能够减轻过氧化氢诱导的心肌细胞损伤,其可能是通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的表达实现的。
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单位南京军区南京总医院; 第一临床医学院; 南京中医药大学