摘要
以赤小豆凝集素为研究对象,采用响应面试验对其提取工艺进行优化。采用硫酸铵分级沉淀法、Q Sepharose XL阴离子交换色谱、Phenyl FF HP疏水层析色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱进一步纯化,通过SDS-PAGE电泳对其蛋白质进行分析。结果表明,赤小豆凝集素的最优提取条件为:以PBS为浸提液,料液比1∶23(g/mL),pH 7.8,持续时间14h,此条件下凝集活性为(37.18±0.18)HU;纯化后的凝集素凝集活性达127HU,经鉴定目标凝集素具有两条亚基,分子量分别在55kDa和27kDa附近。
- 单位