摘要
目的 观察柴胡陷胸汤对高脂血清诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(ECV304)核转录因子-κB(NF-κB)炎性信号通路表达的影响,探讨柴胡陷胸汤抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 将清洁级健康新西兰大耳白兔随机分为正常对照组、柴胡陷胸汤低剂量组、柴胡陷胸汤中剂量组、柴胡陷胸汤高剂量组、辛伐他汀组,制备含药血清;另制备兔高脂血清。体外培养ECV304细胞,实验分为正常对照组、高脂血清组、柴胡陷胸汤低剂量组、柴胡陷胸汤中剂量组、柴胡陷胸汤高剂量组、辛伐他汀组。其中正常对照组、高脂血清组用20%正常兔血清预处理2 h,柴胡陷胸汤低剂量组、柴胡陷胸汤中剂量组、柴胡陷胸汤高剂量组、辛伐他汀组用20%各组含药血清预处理2 h,除正常对照组外其余各组加入50 mL/L高脂血清20%刺激24 h后进行各项指标测定。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测内皮细胞存活率;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测NF-κB、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达。结果 与正常对照组相比,高脂血清组ECV304细胞存活率明显下降(P<0.01),NF-κB、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.01);与高脂血清组相比,柴胡陷胸汤各剂量组和辛伐他汀组ECV304细胞存活率均明显上升(P<0.05或P<0.01),NF-κB、TNF-α、ICAM-1、VCAM-1蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),且柴胡陷胸汤各剂量组存在一定剂量依赖性,其中以辛伐他汀组和柴胡陷胸汤高剂量组作用更为明显。结论 柴胡陷胸汤能够通过抑制NF-κB炎性信号通路,降低炎性因子水平,进而减少炎症反应,保护高脂血清诱导的内皮细胞损伤。
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单位湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学