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摘要
目的 脊髓损伤(SCI)后有效防止神经元的进一步凋亡，是改善神经损伤修复的关键，而去乙酰化酶SIRT1在神经系统疾病中发挥着重要保护作用。文中旨在探索SIRT1在脊髓损伤修复中的表达与相关性，并探讨其对神经元损伤修复的调节机制。方法 将40只大鼠随机分为Sham组(仅打开椎板，然后缝合)、SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组(分别在1w、2w、4w处死大鼠，取出脊髓组织),每组10只。利用qPCR、Western blot检测各组脊髓组织中SIRT1表达量，ELISA检测8-OHdG的表达；通过小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞和H2O2制作体外神经元氧化损伤模型，并给予SIRT1激动剂(SRT1720),利用CCK8实验确定H2O2和SRT1720浓度后将细胞分为对照组、2μmol/L SRT1720组、100μmol/L H2O2组、2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2O2组。利用TUNEL实验检测细胞凋亡水平，Western blot和免疫荧光染色检测SIRT1、自噬相关通路蛋白的表达。结果 SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组脊髓中SIRT1的表达较Sham组显著降低，且随病程延长而逐渐降低(P<0.01)。SCI 1 w组、SCI 2 w组、SCI 4 w组脊髓中的8-OHdG含量显著高于Sham组，随损伤时间延长而增加，与SIRT1蛋白表达呈负相关(r=-0.67,P<0.05)。体外细胞培养的TUNEL结果显示，2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2O2组及对照组细胞凋亡水平明显低于100μmol/L H2O2组(P<0.01)。Western blot检测结果显示，2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2O2组PI3K、AKT、mTOR、Caspase-3蛋白表达明显低于对照组和100μmol/L H2O2组(P<0.05),而2μmol/L SRT1720组和2μmol/L SRT1720+100μmol/L H2O2组SIRT1、LC3B表达水平显著高于对照组和100μmol/L H2O2组(P<0.01)。结论 SIRT1的表达与脊髓损伤病理过程密切相关，且SIRT1通过调节PI3K/AKT/mTOR自噬信号途径，降低神经元凋亡来促进神经元损伤修复。
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