摘要
为了对来自酵母细胞的天然转化酶分子进行改造,以使其适用于工业和医药领域,利用壳寡糖(COS)对酵母转化酶(YInv)的氨基进行修饰。结果发现:COS修饰后的糖链成功连接到转化酶肽链的氨基上,修饰酶(COS-Inv)的分子量比天然酶(YInv)的明显增大;COS-Inv的催化活性比YInv的提高200.3%。YInv和COS-Inv分子中的多糖含量分别为2.75和6.34 mg/mg。COS-Inv的Km值(58.92 mmol/L)比YInv的Km值(125.45 mmol/L)低得多。YInv和COS-Inv的三维荧光光谱测定结果表明,COS-Inv的荧光强度比YInv的荧光强度低得多,说明COS-Inv与YInv两者的三维分子结构有非常大的差别。由此可见,利用壳寡糖修饰酵母转化酶以改造其分子结构是提高其催化活性的有效办法。
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