鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立

作者：高峰; 华利忠; 于伯华; 王建峰; 张丹; 张琳; 唐泰山; 张常印

来源：动物医学进展, 2019, 40(05): 7-12.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.05.002

• 环介导等温扩增技术
• 高通量
• 微流控芯片
• 牛的病毒鉴别检测

为建立牛的主要疫病的快速、准确及高通量鉴别诊断技术,以赤羽病病毒(AKV)、牛白血病病毒(BLV)、蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)5种牛传染病病原为研究对象,将LAMP技术与微流控芯片技术有机结合,建立了相应的基因芯片检测技术,并优化了该基因芯片的反应条件。结果表明,建立的基因芯片可同时检测上述5种病原,特异性好,60 min反应时间即可给出检测结果。其中AKV和PPRV的敏感性为103 copies/μL,BLV的敏感性为105 copies/μL,BTV和BVDV的敏感性为102 copies/μL,与LAMP检测的敏感性一致。成功建立了基于LAMP技术的5重RT-LAMP基因芯片,可同时快速准确检测上述5种病毒,为口岸检疫探索出一种能快速、高通量检测动物疫病的方法。

• 单位
  宁波检验检疫科学技术研究院; 江苏省农业科学院; 江苏出入境检验检疫局