清热化瘀健脾方抑制小鼠结肠炎相关性结肠癌的作用机制

作者：郑燕秋; 游弋晖; 柯俊羽; 宋锦彬; 吴永强; 刘昌辉^*; 李燕舞^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-11.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20232123

• 结肠炎相关性结肠癌
• 清热化瘀健脾方
• Wnt信号通路
• 结肠类器官

目的：探讨清热化瘀健脾方(QHJ)对小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)的干预作用及相关机制。方法：(1)将C57BL/6小鼠随机分为四组：正常组、模型组、QHJ低剂量(QHJ-L， 10g·kg-1)组、QHJ高剂量(QHJ-H， 40g·kg-1)组，除正常组外，采用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)联合化学诱导CAC小鼠模型，造模时间14周。各药物组于第5周开始按剂量灌胃给药，每天一次至14周结束，正常及模型组平行给予等体积水。评估各组小鼠的生存率、结肠长度、重量及病理形态改变；采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt信号蛋白-3a(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化β-连环蛋白(N-P-β-catenin)、胆固醇结合糖蛋白133(CD133)表达；免疫组化(IHC)检测分化簇80(CD80)、CD11抗原样家族成员B(CD11b)蛋白的定位及表达。(2)分离培养CAC小鼠来源的结肠类器官，检测Wnt信号通路相关蛋白表达。结果：(1)QHJ可明显改善CAC小鼠生存率，抑制结肠瘤状体个数。与正常组比较，模型组小鼠结肠组织中Wnt3a、β-catenin、N-P-β-catenin、CD133蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05，P＜0.01)；与模型组比较，QHJ-L组wnt3a、β-catenin水平明显降低(P＜0.01)，QHJ-H组wnt3a、β-catenin、N-P-β-catenin和CD133蛋白水平显著下降(P＜0.05，P＜0.01)。同时，与正常组比较，模型组小鼠结肠中CD11b表达水平明显升高，而CD80水平明显降低(P＜0.05，P＜0.01)；与模型组比较，QHJ-L、QHJ-H组CD11b均明显降低，CD80均升高(P＜0.05，P＜0.01)。(2)CAC模型小鼠结肠类器官中N-P-β-catenin、CD133蛋白的表达均显著升高；而QHJ干预后可抑制模型小鼠结肠类器官N-P-β-catenin、CD133蛋白的表达(P＜0.01)。结论：QHJ可抑制CAC模型小鼠结肠炎-癌进程，其机制可能与调节微环境并抑制Wnt信号过度激活有关。

• 单位
  广州中医药大学; 高州市中医院