基于颜色判定的RT-LAMP技术检测HCoV-NL63冠状病毒基因

作者:耿合员; 汪圣强; 谢晓谦; 肖雨; 张汀; 谭文杰; 苏川
来源:病毒学报, 2016, (01): 56-61.
DOI:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002868

摘要

建立了一种适合于国境口岸简便、快速、灵敏和特异检测人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的核酸检测方法。通过建立基于颜色判定的逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术,针对HCoV-NL63核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N)基因序列设计出6条特异性引物,在等温条件下(63℃)进行扩增反应60min,在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂,并结合浊度仪进行实时监测,以最终反应颜色变化作为结果判断标准。利用该方法对同种属其他人冠状病毒、诺如病毒、流感病毒进行检测,以分析...

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