甜瓜CmGnT基因的克隆及非生物胁迫下的表达分析

作者：张瑞腾; 付秋实; 张磊; 李双桃; 郭仰东; 张红; 李灵芝; 李海平; 王怀松

来源：园艺学报, 2017, 44(07): 1379-1387.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0932

• 甜瓜
• N–乙酰氨基葡萄糖基转移酶
• 基因克隆
• 基因表达
• 非生物胁迫

为了探究非生物胁迫下甜瓜N–乙酰氨基葡萄糖基转移酶基因(CmGnT)的作用机制,根据甜瓜cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术克隆得到CmGnT。生物信息学分析表明,CmGnT的cDNA全长为2 193 bp,开放阅读框(ORF)为1 179 bp,编码392个氨基酸。CmGnT蛋白分子量约为46 kD,理论等电点(pI)为7.93。蛋白结构分析表明,CmGnT含有β–1,4–N–乙酰氨基葡萄糖转移酶结构域,属于糖基转移酶17家族。该基因编码的蛋白有1个强的跨膜螺旋结构。进化树分析表明,CmGnT氨基酸序列与黄瓜CsGnT(登录号:XP004135275.1)亲缘关系最近,同源性为99.74%,与西瓜Cs Gn T的同源性为97.70%。实时荧光定量PCR分析结果表明,在NaCl、PEG、H2O2和ABA等非生物胁迫下的甜瓜叶片中CmGnT都显著上调表达,表明CmGnT受非生物胁迫诱导,推测其在甜瓜响09应非生物胁迫过程中起到重要作用。

• 单位
  中国农业科学院蔬菜花卉研究所; 山西农业大学; 新疆农业科学院哈密瓜研究中心; 中国农业大学