TRIB3与AKT在大鼠睾丸细胞中的相互关联

作者：刘娜; 张岩; 李妍; 杨铮; 云霞; 白杰; 张信来^*; 刘陶迪^*

来源：中国男科学杂志, 2022, 36(01): 34-37+67.

• 睾丸
• 假性激酶蛋白3
• 蛋白激酶B
• 免疫共沉淀
• 蛋白质相互作用
• 大鼠

目的 研究假性激酶蛋白3(Tribbles homology protein3,TRIB3)与蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)在大鼠睾丸细胞中是否存在相互作用关系。方法 普通PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定。利用大鼠睾丸组织培养细胞通过RT-qPCR对Trib3的表达进行检测验证,对照组为野生型大鼠睾丸细胞,实验组为Trib3基因敲除大鼠睾丸细胞,运用Western blot和RT-qPCR检测两组共培养细胞中AKT蛋白和Akt mRNA的表达。利用两步酶消法消化野生型大鼠睾丸细胞,提取总蛋白,运用免疫共沉淀来验证TRIB3与AKT的蛋白互作关系。结果 实验所用大鼠为Trib3基因敲除鼠,Trib3 mRNA在实验组无表达(P<0.05),实验组较对照组AKT蛋白(P<0.05)和Akt mRNA表达升高(P<0.01)。TRIB3抗体免疫沉淀的蛋白复合物中检测到AKT,同时AKT抗体免疫沉淀的蛋白复合物中也检测到TRIB3。结论TRIB3和AKT在大鼠睾丸细胞中存在相互作用。

• 单位
  基础医学院; 内蒙古医科大学; 内蒙古医科大学附属医院