西蓝薹RAPD-PCR反应体系的建立与优化

作者：尹彩霞; 张继栋; 李向阳; 刘自珠; 张华; 张金艳; 乔爱民

来源：仲恺农业工程学院学报, 2010, 23(03): 22-26.

• 西蓝薹
• RAPD
• 反应体系
• 优化

以新型蔬菜西蓝薹为研究对象,采用改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了Taq酶、引物、DNA模板、Mg2+、dNTPs的浓度或用量,建立了西蓝薹RAPD-PCR的最佳反应体系:25μL反应体系中含0.8 UTaq酶、0.40μmol/L引物、30 ng DNA模板、1.6 mmol/LMg2+、0.25 mmol/L dNTPs、2.5μL 10×PCR buffer.利用优化的反应体系,对5个西蓝薹品种进行体系稳定性检测,结果表明该反应体系的重复性和稳定性良好.

• 单位
  广州市农业科学研究院; 仲恺农业工程学院; 广东省教育厅