角膜内皮细胞改良培养技术的初步探讨

作者：胡晓琴; 袁进; 陈家祺; 周辉; 周世有; 王智崇

来源：眼科研究, 2008, (05): 321-325.

DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2008.05.001

• 角膜内皮细胞
• 后弹力层撕除
• 细胞培养 corneal endothelial cells
• Descemet membrane dilacerations
• cell culture

目的评价角膜后弹力层撕除联合酶消化法分离角膜内皮细胞的效率,分析细胞体外生长的生物学特性。方法将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层完整撕下,用胰蛋白酶-EDTA联合酶消化,纯化的角膜内皮细胞进行体外培养。观察细胞形态,用神经元烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定。苏木精-伊红染色以及茜素红-台盼蓝联合染色分析细胞活性,流式细胞仪检测细胞体外生长过程中Anne xiv-PE的表达情况,透射电镜和扫描电镜进行细胞超微结构形态的观察。结果带角膜内皮细胞的后弹力层撕除联合酶消化法可快速获得大量纯化的角膜内皮细胞,快速贴壁生长并增生,体外培养3~4d即融合成单层细胞,且表达神经元烯醇化酶抗体阳性,苏木精-伊红染色及活...

• 单位
  眼科学国家重点实验室; 中山大学中山眼科中心; 南昌大学医学院