重组大肠杆菌产淀粉分支酶的发酵条件探索

作者：鲍春辉; 顾正彪; 李才明; 潘思惠; 李兆丰^*

来源：食品工业科技, 2014, 35(15): 155-162.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2014.15.024

• 淀粉分支酶
• 发酵
• 超声波
• 表达
• 提取

淀粉分支酶可增加淀粉的α-1,6-糖苷键,从而改善淀粉的理化特性和生理功能。本文以可胞内表达Geobacillus thermoglucosidans淀粉分支酶的重组大肠杆菌BL21(DE3)(pET-20b(+)/be)为研究对象,首先研究了超声波提取胞内淀粉分支酶的条件,结果显示,当超声波输出功率为325W,总工作时间为15min,菌液OD600为1.4时,超声波破壁效果最佳。在此基础上,对重组大肠杆菌产淀粉分支酶的摇瓶发酵条件进行了探索,结果表明,最适发酵培养基为TB,初始pH为7.0,在25℃、IPTG浓度为0.01mmol/L下诱导培养12h,发酵所得菌体经超声后产生的淀粉分支酶总酶活最高为222.4U/mL。

• 单位
  江南大学; 食品安全与营养协同创新中心; 食品科学与技术国家重点实验室