摘要
【目的】阐明狄斯瓦螨Varroa destructor唾液毒性蛋白(Varroa toxic protein, VTP)致死中华蜜蜂(以下简称中蜂)Apis cerana工蜂预蛹的机制,从而了解狄斯瓦螨与中蜂的互作机制,为开发蜂螨害防治新技术拓宽思路。【方法】通过酵母双杂交筛选狄斯瓦螨唾液蛋白VTP的互作蛋白;利用RNAi技术和qRT-PCR验证互作蛋白基因功能并检测相关基因表达情况。【结果】利用酵母双杂交筛选到11个候选蛋白基因,进一步通过“回复”验证,脂肪酸结合蛋白(Fatty acid binding protein, FABP)是唯一阳性蛋白;为了进一步验证FABP在体内与VTP结合,通过注射dsRNA-fabp干扰中蜂幼虫fabp的表达,结果发现,注射dsRNA-fabp幼虫组化蛹率(58%)与仅注射VTP组(40%)相比显著提高。qRT-PCR检测发现,fabp沉默后,幼虫的蘑菇体大型凯恩细胞特异性蛋白1基因(Mushroombodylarge-typeKenyon cell-specificprotein1,mblk-1)基因和蜕皮激素受体基因(Ecdysonereceptor,ecr)基因的相对表达量发生变化。【结论】狄斯瓦螨唾液毒性蛋白VTP可能通过与中蜂体内FABP蛋白结合,导致5龄幼虫化蛹失败,从而致死中蜂。
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