基于PI3K/AKT信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞的保护作用

作者：周米露^*; 赵锐; 王大庆; 曾晓莉

来源：解剖学研究, 2021, 43(06): 577-583.

• 糖尿病性白内障
• 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B
• Netrin-1
• 晶状体上皮细胞

目的基于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探讨Netrin-1对糖尿病性白内障(DC)大鼠晶状体上皮细胞(LEC)的保护作用。方法将80只大鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Vehicle组)、治疗组(Netrin-1组)、PI3K/AKT信号通路干预组(LY294002组)。采用腹腔注射链尿佐菌素(STZ)制作大鼠DC模型,Netrin-1组玻璃体腔注射Netrin-1,LY294002组注射Netrin-1+LY294002,Control组、Vehicle组注射等体积PBS,干预1个月。采用苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠晶状体组织病理学改变;免疫组化染色观察晶状体组织E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达;检测晶状体组织氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;MTT法检测LEC增殖活性;Hochest 33258染色检测LEC凋亡情况;透射电镜观察各组LEC超微结构的变化;Western blot检测晶状体组织p-PI3K、p-AKT、caspase-3蛋白表达。结果与Control组相比,Vehicle组大鼠晶状体变浑浊,条索状、片状的LEC向晶状体成纤维细胞聚集,LEC增殖活力明显降低,凋亡能力明显增加,超微结构损伤明显,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达减少,MMP-2、MDA、caspase-3表达增多(P<0.05);与Vehicle组相比,Netrin-1组大鼠晶状体浑浊程度得到明显改善,可见少量LEC向晶状体纤维细胞迁移,增殖活力改善,凋亡细胞减少,细胞形态逐渐改善,E-cadherin、SOD、p-PI3K、p-AKT表达增多,MMP-2、MDA、caspase-3表达减少(P<0.05)。LY294002组晶状体损伤程度明显增加,与Vehicle组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Netrin-1通过激活PI3K/AKT信号通路,保护晶状体组织免受高血糖诱导的氧化应激和细胞凋亡,抑制LEC的迁移和EMT,从而起到延缓糖尿病大鼠白内障进展的作用。

• 单位
  四川省南充市中心医院; 川北医学院