真核表达载体pIRES2-EGFP-AMH的构建及鉴定

作者:严丽丽; 胡蓉*; 李娟; 王飞苗
来源:宁夏医学杂志, 2014, 36(06): 483-480.
DOI:10.13621/j.1001-5949.2014.06.0483

摘要

目的构建人AMH基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-AMH。方法从COV434细胞中获取AMH基因片段,经EcoRI、BglII双酶切定向克隆至载体pIRES2-EGFP,构建pIRES2-EGFP-AMH。经双酶切和测序鉴定后转染COV434细胞,通过荧光定量PCR和细胞免疫荧光技术检测AMH基因的表达变化。结果重组人AMH真核表达质粒经酶切和测序鉴定正确,转染后能显著提高AMH mRNA和蛋白的表达。结论人AMH真核表达载体构建成功,为进一步研究人AMH基因的功能提供初步的实验基础。

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