益气活血法通过miR216b/Beclin1介导萎缩性胃炎癌前病变自噬的机制

作者：赵唯含; 周莹; 许雨晴; 艾亚楠; 文雯; 穆恒^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(10): 117-122.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230990

• 益气活血法
• 萎缩性胃炎癌前病变
• 微RNA216b(miR216b)
• 自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)
• 黄芪
• 三七

目的：通过观察益气活血法对萎缩性胃炎癌前病变(PLGC)模型小鼠微RNA216b(miR216b)/自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)信号通路的影响，探讨其干预PLGC的自噬作用机制。方法：将75只健康雄性SPF级昆明种小鼠随机分为空白组(12只)及造模组(63只)，造模组小鼠每日采用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)溶液(150 mg·L-1)自由饮用及灌胃，同时每日灌胃雷尼替丁溶液(0.03 g·kg-1)，造模12周。按照随机对照表将造模小鼠分为模型组、益气组(黄芪3.5 g·kg-1)、活血组(三七粉0.7 g·kg-1)、益气活血组(黄芪3.5 g·kg-1+三七粉0.7 g·kg-1)及叶酸组(2 mg·kg-1)。予相应药物灌胃8周后取材，苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胃黏膜病理改变，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin1蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组胃黏膜Beclin1及miR-216b的m RNA表达情况。结果：与空白组比较，病理学观察显示模型组胃黏膜固有腺体减少，出现萎缩伴肠上皮化生；与模型组比较，各治疗组均有改善，其中益气活血组改善最为明显。与空白组比较，模型组小鼠胃组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白含量均明显降低(P<0.05)。与模型组比较，各治疗组胃组织LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白含量均有升高(P<0.05,P<0.01)，其中益气活血组升高最为明显。与空白组比较，模型组小鼠Beclin1 m NRA表达下降(P<0.05),miR216b m NRA表达上升(P<0.05)。与模型组比较，各治疗组小鼠Beclin1表达升高(P<0.05),miR216b表达下降(P<0.05)，尤以益气活血组最为明显。结论：以黄芪、三七为代表的益气活血法治疗PLGC的作用机制可能为通过抑制miR216b的表达，激活Beclin1，从而促进自噬，发挥修复胃黏膜的作用。

• 单位
  陕西中医药大学附属医院; 陕西中医药大学