PML-RARα245-hIL-2双基因表达载体的构建和表达研究

作者：胡刚; 岑东芝; 杨力建; 陈少华; 周羽竝; 李扬秋

来源：沈阳医学院学报, 2012, (02): 69-72.

DOI：10.3969/j.issn.1008-2344.2012.02.002

• PML-RARα融合基因
• hIL-2
• 急性早幼粒细胞白血病
• DNA疫苗 PML-RARα fusion gene
• hIL-2
• APL
• DNA vaccine

目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat细胞中扩增hIL-2基因,并将两基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测该质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交和ELISA技术检测目的蛋白的表达。结果:Nhe I/Mlu I和Sal I/Not I双酶切证明重组质粒中含有相应大小的P...

• 单位
  生物化学教研室; 暨南大学; 广东省惠东县人民医院