摘要

目的:探索黑茸补肾颗粒对白消安诱导的小鼠精子发生障碍的治疗作用,并揭示其调控睾丸生精功能的机制。方法:将48只雄性小鼠随机分为6组,分别为空白对照(BC)组、阴性对照组(NC)、HKTG-1组、HKTG-2组、HKTG-3组、HKTG-4组。除BC组外,其余组通过腹腔注射40 mg/kg体重的白消安建立精子发生障碍小鼠模型,BC组、NC组给予生理盐水灌胃,HKTG-1组给予黑茸补肾颗粒药剂1中添加鹿茸400 mg/kg体重、HKTG-2组给予黑茸补肾颗粒药剂1中添加鹿茸800 mg/kg体重、HKTG-3组给予黑茸补肾颗粒药剂2中添加黑蚁400 mg/kg体重、HKTG-4组给予黑茸补肾颗粒药剂2中添加黑蚁800 mg/kg体重,药剂研磨后以生理盐水为溶剂灌胃给小鼠,1次/d,连续给药5周,记录各组小鼠每日平均体重,造模结束后记录各组小鼠睾丸重量,HE染色检测小鼠睾丸组织显微结构,实时荧光定量PCR检测标记基因表达水平。结果:与BC组相比,NC组和黑茸补肾颗粒治疗组小鼠的体重及日增重无显著差异;与NC组相比,HKTG-1组睾丸重量显著增加(P<0.05);睾丸组织HE染色结果显示,与NC组相比,HKTG-1和HKTG-2组的生精小管中有大量生殖细胞,包括管腔中已变形的精子细胞,HKTG-3和HKTG-4组的生精小管中也出现了一定数量的生殖细胞(精原精母细胞),但管腔中几乎没有变形的精子细胞。睾丸组织的实时荧光定量PCR结果显示,与NC组相比,HKTG-1组的总生殖细胞标记基因(Ddx4)、精原细胞标记基因(Dazl)、精母细胞标记基因(Sycp3)相对表达量显著上调,精子细胞标记基因(Tnp1)则显著上调(P<0.05)。HKTG-1组的支持细胞数量显著降低(P<0.05),支持细胞标记基因(Sox9)下调,这与其生殖细胞数量多相对应。HKTG-3、HKTG-4组的Ddx4、Dazl、Sycp3和Tnp1基因相对表达量无显著变化,支持细胞数量也没有显著变化。与NC组相比,HKTG-1组显著改善小鼠睾丸组织的精子发生,表现为上调减数分裂相关基因(Meioc、Stra8、Spo11)的表达。结论:黑茸补肾颗粒可能是通过促进减数分裂的发生,改善小鼠睾丸组织内生精细胞的功能,进而增加精子的生成。

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