小檗碱通过mtROS-NLRP3通路抑制H2O2诱导的巨噬细胞焦亡

作者：苏日娜; 刘天怡; 马璐瑶; 刘梦华; 周娜; 郝钰^*

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(09): 1064-1068.

• 小檗碱
• 巨噬细胞
• 氧化应激
• 细胞焦亡
• mtROS-NLRP3通路

目的：探究小檗碱(BBR)对过氧化氢(H2O2)诱导的巨噬细胞焦亡的影响及mtROS-NLRP3通路在其中的调控作用。方法：以巨噬细胞J774A.1为研究对象，设置正常对照组(control组)、模型组(H2O2作用24 h)、BBR干预组(H2O2+BBR作用24 h)和ROS清除剂NAC干预组(H2O2+NAC作用24 h)。流式细胞术检测各组细胞活性氧簇(ROS)的生成，免疫荧光检测ROS与线粒体的共定位情况，实时荧光定量PCR检测各组细胞NLRP3、IL-1β的基因转录水平，Western blot检测NLRP3蛋白表达量，流式细胞术检测caspase-1的活化及其介导的细胞焦亡率，乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞LDH的释放量，ELISA检测IL-1β分泌水平。结果：与模型组相比，BBR干预后显著减少了H2O2诱导的巨噬细胞线粒体ROS(mtROS)的生成，下调了NLRP3和IL-1β的基因表达水平，减少了NLRP3蛋白的表达，降低了caspase-1活化水平及其介导的细胞焦亡率，同时减少了细胞上清液中LDH和IL-1β的释放。结论：小檗碱可能通过下调mtROS水平进而抑制NLRP3炎症体介导的细胞焦亡以减轻炎症反应。

• 单位
  北京中医药大学; 生命科学学院