溶藻弧菌HY9901转运蛋白TolB的原核表达及条件优化和纯化

作者：周泽军; 庞欢瑛; 丁燏; 简纪常; 吴灶和

来源：中国农学通报, 2013, (11): 55-59.

• 溶藻弧菌
• tolB基因
• 原核表达
• 优化
• 纯化 Vibrio alginolyticus
• tolB gene
• prokaryotic expression
• optimization
• purification

为研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)HY9901转运蛋白TolB作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的溶藻弧菌HY9901转运蛋白TolB序列(JQ846501),设计1对带酶切位点的引物,PCR扩增tolB基因,然后经酶切、连接等步骤,构建tolB基因的原核表达载体pET-TolB,并对其IPTG浓度、诱导时间、温度、洗脱浓度进行优化,以期获得较大量的目的蛋白。结果表明:IPTG诱导后经SDS-PAGE与Western-blot分析,成功表达了溶藻弧菌HY9901株TolB蛋白,分子量与预期相符,且表达的蛋白以包涵体的形式存在;TolB蛋白在大肠杆菌中诱导表达的优化条件...

• 单位
  广东海洋大学; 仲恺农业工程学院; 广东省教育厅