长链非编码RNA对牙本质基质蛋白1的调控机制

作者:李博亚; 伍虹; 夏昕; 陈绛媛; 余艳崧; 庄沛林; 阮毅
来源:中华口腔医学研究杂志(电子版), 2017, 11(01): 7-11.

摘要

目的初步探究长链非编码RNA(lnc RNA)对牙本质基质蛋白1(DMP1)基因表达的调控机制。方法在MC3T3-E1细胞中,运用Western blot以及实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验观察lnc RNA32865与DMP1的变化趋势。构建含有荧光素酶报告基因的DMP1启动子载体,并与lnc RNA过表达质粒、si-lnc RNA32865分别共转染后,观察DMP1启动子活性以及lnc RNA32865对其的影响。数据进行统计学处理,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果 Western blot以及实时荧光定量PCR实验结果显示,在MC3T3-E1细胞中过表达lnc RNA32865时,DMP1基因表达量(0.236±0.022)较对照组降低(t=59.816,P<0.001),抑制lnc RNA32865时,DMP1基因表达量(1.994±0.133)较对照组升高(t=-12.989,P=0.006)。荧光素酶报告基因检测表明DMP1启动子有活性(t=-77.360,P<0.001)。与转染DMP1启动子处理组(6.018±0.105)比较,DMP1启动子质粒与lnc RNA32865过表达质粒共转染组荧光强度(3.877±0.120)显著降低(t=50.713,P<0.001),而DMP1启动子质粒与si-lnc RNA32865共转染组荧光强度(17.296±0.674)显著增加(t=-26.612,P=0.001)。结论初步证明lnc RNA32865与DMP1表达趋势相反,lnc RNA32865通过与DMP1基因的启动子区相互作用,以此调控DMP1的基因表达。