摘要
目的探讨雄激素受体关联蛋白p21活化激酶-6(PAK6)激酶活性表达对前列腺癌细胞体外生长的影响。方法根据PAK6基因序列构建野生型、激酶激活型和失活型表达载体,通过Lipofectamine转染前列腺癌细胞LNCaP,经.G418筛选稳定表达株,以PAK6磷酸化抗体行免疫印迹测定各细胞激酶的表达。观察细胞形态变化,MTT法测定各细胞株的增殖状况,对比各细胞株对雄激素刺激的不同效应。结果成功建立了稳定表达野生型、激活和失活型PAK6激酶的LNCaP细胞株。野生型与激酶激活型PAK6可导致前列腺癌细胞棱角增多,与对照组比较增殖速度分别下降32.1%和39.3%(P值均<0.01)。激酶失活型PAK6转染的LNCaP细胞由多突起形变为圆形,并呈簇状生长,增殖速度较对照组细胞加快110.7%(P<0.01)。与对照组细胞比较,野生型、激活型和失活型转染细胞对双氢睾酮的生长反应出现不同程度的下降,增殖速度分别下降40.7%、51.9%、30.6%(P值均<0.01)。结论过度表达并维系PAK6激酶活性可抑制LNCaP细胞生长,丧失PAK6激酶活性可导致LNCaP细胞增殖加快,PAK6激酶活性可影响雄激素对LNCaP细胞的生长调控。
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