抗人Her2抗原羊驼纳米抗体的筛选与鉴定

作者：王兰东; 刘枫; 成岩; 李大磊; 韩冰; 张淑敏; 冯东晓

来源：军事医学, 2017, 41(03): 184-189.

DOI：10.7644/j.issn.1674-9960.2017.03.006

• Her2
• 纳米抗体
• 噬菌体展示技术
• 乳腺肿瘤
• 诊断

目的获得靶向人Her2纳米抗体。方法使用重组人Her2蛋白免疫羊驼,分离免疫后羊驼的淋巴细胞提取总RNA,利用PCR技术扩增羊驼Ig G的可变区(VHH)基因片段,构建噬菌体表面展示的纳米抗体文库,采用Her2抗原对文库进行亲和筛选,将筛选到的克隆转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体并用ELISA技术和Biacore检测其与抗原Her2的亲和力,采用免疫组化方法检测Her2阳性乳腺癌组织中Her2的表达。结果第二轮筛选后得到2个抗体H3和H5,ELISA结果显示两者都具有抗原结合活性,其中H5的亲和力达8.106×10-10mol/L。H5可识别乳腺癌组织中Her2抗原的表达。结论从Her2免疫的羊驼体内,通过噬菌体展示技术筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗Her2纳米抗体,可用于乳腺癌的病理诊断。

• 单位
  山东国际生物科技园发展有限公司; 滨州医学院; 山东绿叶制药有限公司