摘要
目的建立成骨细胞条件性FoxO1基因敲除的糖尿病小鼠模型,并进行初步的表型研究。方法设计基因敲除策略,获得野生型和纯合小鼠。提取鼠尾组织DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增后鉴定其基因型。分别提取小鼠原代成骨细胞mRNA和蛋白质,以及其他组织的mRNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot技术检验FoxO1的表达。在不同时间点监测小鼠体重、血糖,并进行胰岛素耐受实验。结果成功建立FoxO1基因敲除小鼠模型并诱发糖尿病,糖尿病小鼠从第2周开始体重明显低于正常小鼠。在糖尿病条件下,纯合小鼠血糖值明显低于野生型小鼠,其胰岛素敏感性明显高于野生型小鼠。结论成功建立了成骨细胞条件性FoxO1基因敲除小鼠模型;FoxO1基因敲除可改善糖尿病小鼠的高糖血症,可能是由于FoxO1基因敲除增加了糖尿病小鼠的胰岛素敏感性。
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单位口腔疾病研究国家重点实验室; 四川大学华西口腔医院