生姜腐皮镰刀菌的分离鉴定及PCR快速检测方法构建

作者：周洁; 张玲玲; 袁继荣; 秦曼丽; 刘续立; 何杨; 吴林; 贾切^*; 刘奕清^*

来源：植物病理学报, 2022, 52(04): 681-690.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.000590

• 生姜
• 枯萎病
• 腐皮镰刀菌
• PCR检测

由腐皮镰刀菌(Fusarium solani)引起的生姜枯萎病是一种毁灭性真菌土传病害，其病原菌的快速高效检测，有助于枯萎病的早期诊断及预警。通过回接试验、形态学观测以及系统进化树分析，对湖北生姜产区分离的菌株进行鉴定，获得生姜腐皮镰刀菌(F.solani)。基于镰刀菌属通用引物TEF-1αF/TEF-1αR基因序列，以腐皮镰刀菌基因组DNA为模板进行扩增测序，根据序列信息设计筛选出一对腐皮镰刀菌特异性引物，构建了基于普通PCR的快速高效分子检测方法，并对接种过病菌的生姜植株和土壤进行检测验证。通过病原菌的菌落形态、孢子显微结构观察、真菌通用引物ITS1/ITS4鉴定和致病性测定，确定引起生姜枯萎病的病原菌为腐皮镰刀菌(F.solani)。用设计的特异性引物F8/R8进行PCR,特异扩增获得约381 bp的目标条带，检测灵敏度为454 pg·μL-1,利用该引物对带菌生姜幼苗和土壤进行检测验证，证实可从发病生姜幼苗和带菌土壤中特异性检测到腐皮镰刀菌(F.solani)。本研究明确了引起湖北生姜枯萎病的病原菌为腐皮镰刀菌(F.solani),并建立了PCR快速检测方法。该检测方法简便、灵敏、高效，可用于生姜枯萎病的早期诊断与预防。

• 单位
  长江大学