解毒生肌膏调控GSK-3β/β-catenin减轻炎症反应促糖尿病SD大鼠慢性创面修复的影响

作者：袁忠行; 陈丽; 丁雅容; 王巍; 王宇萌; 郑时旭; 洪恺祺; 周忠志

来源：重庆医科大学学报, 2023, 48(09): 1069-1077.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003338

• 糖尿病慢性创面
• 解毒生肌膏
• 糖原合成酶激酶-3β
• β-连环蛋白
• 炎症因子

目的：从GSK-3β/β-catenin角度探讨炎症反应对糖尿病SD大鼠慢性创面修复的影响。方法：使用高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲霉素（Streptozocin,STZ）及手术制备全层皮肤缺损的方法建立糖尿病SD大鼠创面模型，成模后随机分为模型组（n=15），磺胺嘧啶银组（n=15）及解毒生肌膏组（n=15），并设立正常创面组（n=15）。磺胺嘧啶银组创面和解毒生肌膏组创面予以磺胺嘧啶银软膏和解毒生肌膏外敷，每日1次，模型组与正常创面组不予干预。给药后第3天、7天和14天肉眼观察各组大鼠的创面愈合情况，计算创面愈合率；HE观察组织基本形态；Masson检测胶原生成情况；超微电镜观察内质网结构差异；免疫组织化学法检测肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)表达；蛋白质免疫印迹法检测糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)蛋白和β-连环蛋白（β-catenin）蛋白表达。结果：给药后3天解毒生肌膏组创面愈合率高于模型组（P<0.05）；给药后14天解毒生肌膏组创面愈合率高于磺胺嘧啶银组（P<0.05）。HE结果：给药后3、7天解毒生肌膏组创面较其他组肿胀程度较小，毛细血管数量丰富；14天，解毒生肌膏组和正常创面组出现皮肤附属器新生，组织结构完整度好。Masson结果：解毒生肌膏组较其他各组胶原纤维分布均匀，排列结构较为整齐，新生胶原纤维更为粗壮，分布均匀，排列整齐。电镜结果：解毒生肌膏组内质网丰富，数量较多，形态结构趋于正常。免疫组织化学法结果：与模型组相比，各组TNF-α、IL-6表达水平明显降低；解毒生肌膏组TNF-α表达水平低于正常创面组；解毒生肌膏组TNF-α、IL-6表达低于磺胺嘧啶银组。Western blot法结果显示：与正常创面组相比，各组β-catenin表达量均上调（P<0.05），解毒生肌膏组上调表达量最少；与正常创面组相比，各组GSK-3β蛋白表达含量明显下调（P<0.05）；给药后7天，磺胺嘧啶银组和解毒生肌膏组GSK-3β蛋白表达含量上调（P<0.05），但仍低于正常创面组。结论：解毒生肌膏作用糖尿病大鼠创面修复机制通过调控GSK-3β和β-catenin表达，使炎症因子IL-6和TNF-α表达下调，最终达到糖尿病大鼠慢性创面愈合。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院