真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2的构建和鉴定

作者：唐昊喆; 王勤涛; 董广英; 马志伟; 丁敖; 李堃; ***; 王莉

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2007, (09): 503-506.

• 骨形成蛋白2
• 转染

目的:构建并鉴定人hBMP2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2。方法:采用RT-PCR方法从人成骨肉瘤细胞中克隆hBMP2基因,连接T载体并测序正确后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接,并进行酶切鉴定,最后将pIRES2-EGFP-hBMP2转染入HEK293细胞中,利用荧光显微镜和Western blot进行表达鉴定。结果:成功克隆了人BMP2基因,酶切鉴定和测序均正确,构建的真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2能够正确表达hBMP2蛋白。结论:构建了hBMP2基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2,为研究该基因的功能奠定了基础。

• 单位
  第四军医大学