动物组织冷冻切片法的改良及应用

作者：潘建洪; 陈秋玉; 邢青波; 李恭贺; 吴文德; 刘灵康; 郑喜邦^*

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(12): 5520-5525.

DOI：10.13417/j.gab.039.005520

• 免疫组织化学
• 冷冻切片
• 石蜡切片

冷冻切片的优点是能完好保存有机溶剂及热敏感抗原,其缺点是制片过程中形成冰晶影响免疫组织化学检测结果。为了解决这一难题,我们对现有的冷冻切片法进行了改良。多聚甲醛固定和蔗糖脱水后的脑、肺和睾丸组织,在包埋和切片之前,利用OCT包埋剂(聚乙二醇和聚乙烯醇水溶性混合物)进行预包埋,切片后进行苏木精伊红染色(hematoxylin eosin staining, HE染色)和免疫组织化学染色(Immunohistochemical staining, IHC染色),并比较了改良冷冻切片法、常规冷冻切片法和石蜡切片法制作的切片HE和IHC染色效果。结果显示,切片前使用OCT包埋剂充分浸润组织6～48 h,可显著地提高冷冻切片质量;与常规冷冻切片法相比,用改良法制作的睾丸和脑组织冷冻切片结构更加清晰,因冰晶形成的空洞较少,总体质量均得到极大提高;与传统石蜡切片相比,改良法制作的肺组织冷冻切片质量尤佳。本研究建立了一种适用于免疫组织化学研究的冷冻切片新方法,无需使用液氮骤冷,大幅降低了多组织样品制片的难度,并且获得了正确的IHC染色结果,从而简化了实验流程,为组织形态学研究和抗原检测提供了可靠手段。

• 单位
  广西大学