黑鹅绒海芋体细胞胚发生和植株再生

作者:刘小飞; 孙映波; 黄丽丽; 杨钰钗; 朱根发; 于波
来源:植物学报, 2023, 58(05): 750-759.
DOI:10.11983/CBB22106

摘要

该研究建立了黑鹅绒海芋(Alocasia reginula)体细胞胚胎发生途径的植株再生体系。通过叶柄诱导获得胚性愈伤组织,以此建立胚性细胞悬浮培养系,并实现了高频率的植株再生。叶柄外植体在添加2.0 mg·L–12,4-D和1.0 mg·L–1TDZ的MS培养基上诱导胚性愈伤组织的效率最高(达81.3%)。将胚性愈伤组织破碎成细胞团,转移至添加2.0 mg·L–12,4-D和1.0 mg·L–1TDZ的MS液体培养基中进行悬浮培养,2周继代1次,悬浮培养12周后获得大量细胞团。将悬浮培养28周的细胞团转移至不含植物生长调节剂的1/2MS固体培养基上进行分化培养,平均每个细胞团可再生2.3–2.5棵植株。利用光学显微镜和扫描电镜观察体细胞胚的萌发和形成。再生苗移栽至温室4个月后,成活率为95.3%。通过流式细胞术对随机选取的50株成活植株进行检测,未发现染色体倍性变异,核DNA含量为10.94 pg·(2C)–1,基因组大小为5 290.12 Mb·C–1。植株移栽到温室直至自然开花,表型无明显变异。研究结果可为黑鹅绒海芋种苗商业化生产和生物技术育种提供良好的技术支持。

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