摘要
目的:通过RNA干扰技术使TREM-1基因沉默后研究Pg-LPS、Ec-LPS和oxLDL炎症反应以及对泡沫细胞的影响。方法:体外转录法合成针对TREM-1 mRNA的shRNA,转染入小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7,以Pg-LPS、Ec-LPS以及oxLDL刺激,于转染后通过流式细胞术检测TREM-1的表达,并用ELISA法检测RAW264.7上清中促炎症因子TNF-α含量的变化;油红O染色观察TREM-1基因沉默后泡沫细胞的情况。结果:转染shRNA后TREM-l表达明显下调,其中以shRNA-1干扰效果最为明显。同时,转染shRNA使RAW264.7上清中TNF-α含量明显降低。而对照组无类似效果。TREM-1基因沉默后油红O染色阳性细胞数减少(P<0.05),shRNA-1干扰效果最佳。结论:转染体外转录合成的shRNA可选择性抑制TREM-1表达,下调Pg-LPS、Ec-LPS以及ox LDL诱导的促炎症因子的分泌,对炎症反应和细胞泡沫化具有抑制作用。
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单位南京大学; 厦门市口腔医院