角毛壳菌木聚糖酶基因xyn24在毕赤酵母中的高效表达及产酶的固定化研究

作者：王艳君; 杨谦

来源：食品与发酵工业, 2012, (08): 29-35.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2012.08.002

• 角毛壳菌
• 木聚糖酶
• 毕赤酵母
• 固定化 Chaetomium cupreum
• xynalase
• Pichia pastoris
• immobilized

以生防真菌角毛壳菌(Chaetomium cupreum)菌丝体时期的基因文库为基础,筛选得到编码木聚糖酶基因的片段,经拼接及RT-PCR扩增得到全长690bp的编码β-1,4-木聚糖酶基因序列,利用基因重组的方法构建可在毕赤酵母分泌表达系统中表达的木聚糖酶重组载体,并转化毕赤酵母得到重组子。在毕赤酵母醇氧化酶AOX1基因启动子的作用下,重组蛋白得到高效表达,表达蛋白分泌到培养基中,分子质量约为19.4 ku;以水溶性壳聚糖为底物测得酶活为2.72 U/mL。SDS及金属离子Mn2+对酶活性具有较强的激活作用;转化子经10代传代培养后酶活性稳定。通过制备的壳聚糖微球对木聚糖酶进行了固定化研究,...

• 单位
  哈尔滨工业大学; 福建师范大学福清分校