摘要

油莎豆起源于非洲和地中海沿岸,是一种在块茎中高水平积累油脂的新型草本油料作物。水分平衡对于块茎的发育与代谢至关重要。液泡膜内在蛋白(TIP)是一类液泡膜定位并具有高效水分转运活性的水通道蛋白,包含TIP1–5等5个亚类。研究基于油莎豆的基因组和转录组数据,采用RT-PCR技术对一个块茎高水平表达的TIP基因CeTIP2;1进行了克隆。序列分析表明,CeTIP2;1的基因全长3323 bp,含有2个内含子,编码区长747 bp,编码248个氨基酸,理论分子量为24.73 kDa、等电点为5.09、总平均疏水指数为0.948、脂肪族指数为114.60、不稳定系数为21.76,属于稳定的酸性疏水型蛋白,与其液泡膜定位一致;蛋白含有保守的MIP结构域,其中包括6个跨膜螺旋、2个半螺旋以及2个典型的NPA基序。CeTIP2;1与AtTIP2;1的序列相似性高达87.20%,远高于与SoPIP2;1的46.23%。进化分析进一步证实,CeTIP2;1隶属于TIP2亚类,是AtTIP2;1的直系同源基因。值得注意的是,进化分析同时显示TIP2亚类早在单双子叶植物分化之前就已经进化出2个小组。表达分析显示,CeTIP2;1在叶片、叶鞘、根、芽尖、匍匐茎、块茎等主要组织中的均有较高水平的表达,丰度最高的是块茎和匍匐茎,最低的为芽尖;在块茎的发育过程中,呈现先升后降的钟形趋势,峰值出现在膨大中期,最低的为成熟期。此外,CeTIP2;1还在块茎的蛋白组中被检测到,暗示其功能的重要性。这些结果为进一步揭示油莎豆的块茎水分平衡机制奠定了坚实的基础。