摘要
目的观察LINGO-1与Wnt7b在脊髓神经干细胞(neural stem/progenitor cells,NSPCs)增殖过程中的表达及作用。方法体外培养C57BL/6小鼠NSPCs并分为对照组及干扰组,scramble组感染scramble慢病毒,干扰组感染LINGO-1 shRNA慢病毒下调LINGO-1表达,并验证其下调LINGO-1基因的效率,观察NSPCs的增殖情况。通过转录组测序,筛选LINGO-1下游作用mRNA。体外观察下调LINGO-1表达,Wnt7b的mRNA及蛋白表达情况。结果小鼠脊髓来源NSPCs表达神经干细胞特异性标志物Nestin。慢病毒转染NSPCs后,转染效率达到90%以上,LINGO-1 shRNA可以使LINGO-1表达下降至对照组的0. 42±0. 067倍(P <0. 05)。干扰组S期较对照组S期显著增高(23. 6%±2. 1%vs 13. 1%±1. 7%,P <0. 05)。转录组测序提示LINGO-1功能主要富集于蛋白结合功能调控,其中Wnt7b为可能调控因子。与对照组相比较,LINGO-1 shRNA组mRNA提高3. 4±0. 22倍(P <0. 05),蛋白表达提高2. 0±0. 14倍(P <0. 05)。结论 LINGO-1可以在体外下调脊髓神经干细胞增殖,这一作用可能与其下调Wnt7b表达有关。
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