微小RNA-520e对非小细胞肺癌细胞侵袭迁移和JAK1/STAT3信号通路的影响

作者：言成一; 杨继承; 袁跃西

来源：临床肿瘤学杂志, 2019, 24(11): 978-983.

• 非小细胞肺癌
• 微小RNA-520e
• 侵袭迁移
• 含锌指和BTB结构域7A

目的探讨微小RNA-520e(miR-520e)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞侵袭迁移和Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞株H1299、H1975、H1650、A549的miR-520e水平;体外常规培养A549细胞并采用脂质体分别转染模拟物(过表达组)和阴性对照序列(NC组),以仅经脂质体处理的细胞为对照组。采用QPCR、活细胞计数CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测miR-520e和含锌指和BTB结构域7A(ZBTB7A)水平、增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-9、磷酸化JAK1(p-JAK1)和磷酸化STAT3(p-STAT3)水平;双荧光素酶报告基因系统联合荧光素酶报告质粒psiCHECK-2验证miR-520e与ZBTB7A的靶向关系。结果与正常细胞相比,NSCLC细胞的miR-520e水平降低,其中A549细胞最低,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的miR-520e水平为19.562±1.448,高于对照组的1.002±0.057和NC组的1.053±0.082,ZBTB7A水平为0.173±0.026,低于对照组的1.109±0.091和NC组的1.076±0.136,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组和NC组相比,过表达组转染36、48 h后的增殖活力及转染48 h后的MMP-9、p-JAK1和p-STAT3水平均降低(P<0.05)。过表达组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(23.618±3.684)%和(51.644±7.069)个,低于对照组的(57.089±4.569)%和(152.269±12.833)个及NC组的(59.267±5.671)%和(149.075±11.239)个(P<0.05)。MiR-520e模拟物与携带野生型ZBTB7A 3’端非翻译区的psiCHECK-2载体共转染细胞的相对荧光强度降低(P<0.05)。结论 miR-520e在NSCLC细胞中表达下调且可能通过靶向ZBTB7A降低JAK1/STAT3信号通路活性来抑制NSCLC细胞的增殖、侵袭和迁移。

• 单位
  长沙市中心医院