人尿液中exosomes的分离及鉴定

作者:李艳艳; 张渊; 代义; 邱峰; 秦霞; 邱宗荫
来源:中国生物制品学杂志, 2011, (02): 230-232+236.
DOI:10.13200/j.cjb.2011.02.112.liyy.006

摘要

目的分离人尿液中的exosomes,并对其超微形态学和免疫特性进行鉴定。方法以超速离心法分离健康志愿者混合尿液中的exosomes,通过负染电镜和免疫电镜技术对exosomes进行鉴定,运用1-D SDS-PAGE对其蛋白质组分进行分离。结果 4℃,17 000×g离心15 min后的上清液于4℃,200 000×g离心1 h可得到纯度较高的exosomes。负染电镜可见exosomes为扁平或球形小体,直径主要在60 nm左右;免疫电镜显示,黑色胶体金颗粒均匀分布在exosomes球形体表面,因其具有很高的电子密度而呈现为清晰可辨的黑点;1-D SDS-PAGE分析显示,exosomes高丰...

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