僵蚕醇溶蛋白质的优化提取及其指纹图谱研究

作者：王立勇; 黄佳滢; 朱锐灵; 徐悦; 汤建; 闻崇炜^*

来源：江苏农业科学, 2020, 48(22): 196-201.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2020.22.037

• 僵蚕
• 醇溶蛋白质
• 响应面法
• FTIR指纹图谱
• SDS-PAGE
• HPLC

为优化僵蚕醇溶蛋白质的提取工艺,并建立相应的SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)、HPLC(高效液相色谱)、FTIR(傅里叶变换红外光谱)指纹图谱。在单因素试验的基础上,利用响应面法,以提取率为响应值建立数学模型,获得最佳工艺,用SDS-PAGE、HPLC、FTIR建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱。通过单因素试验考察乙醇浓度、料液比、温度、提取时间对僵蚕醇溶蛋白质提取率的影响,进而用Box-Behnken法设计4因素3水平试验,进行响应面回归分析。结果表明,僵蚕醇溶蛋白质的最佳提取工艺条件为料液比1g∶24.22mL,乙醇浓度38.73%,温度35℃,提取时间3.94 h,此时的提取率为0.540 2%。用SDS-PAGE、HPLC、FTIR法建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱,SDS-PAGE分析结果表明,僵蚕醇溶蛋白质分子量集中在16.7～36.2 ku;HPLC分析结果表明,主要僵蚕醇溶蛋白质的保留时间为2.048 min与3.354 min,其含量分别占总蛋白量的31.23%与32.93%;FTIR分析结果表明,僵蚕醇溶蛋白质在2 927.71、1 631.71、1 457.24、1 310.71 cm-1处有主要吸收峰。研究并建立了僵蚕醇溶蛋白质的优化提取条件,并获得了蛋白质的SDS-PAGE、HPLC、FTIR指纹图谱。

• 单位
  亳州学院; 江苏大学