抗SARS-CoV人源Fab抗体的表达及鉴定

作者：李郁; 陈江浩; 包国强; 张思河; 宋斐; 谢丽; 杨红

来源：科学技术与工程, 2006, (11): 1470-1473.

• 严重急性呼吸综合征(SARS)
• 刺突蛋白
• 噬菌体抗体
• Fab

为进一步研究抗SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)的中和抗体2g7,对其进行了原核表达,将2g7转入琥珀突变的非抑制性菌株(SupE-)的大肠杆菌Top10F’中进行可溶性表达。用HPLC纯化后,SDA-PAGE显示2g7的轻重链均存在,ELISA,Westernblot检测显示2g7能与SARS-CoV的S1蛋白结合。BIAcore测定其与抗原的亲和力为2.67×10-8mol。竞争ELISA显示该抗体能与SARS-CoV刺突蛋白S(Spike)结合并阻断该蛋白与其受体ACE2的结合。实验结果表明:利用免疫噬菌体抗体库能在小库容的情况下筛选获得高亲和性的人源抗体,并可以在大肠杆菌中获得高效表达,这一实验结果为有效性地防治病毒性疾病提供了思路。

• 单位
  西京医院; 第四军医大学