积雪草酸促进成骨细胞分化的机制

作者：许燕; 肖明; 李涛; 彭明政; 强磊; 王金武^*; 翁杰

来源：华西药学杂志, 2019, 34(04): 347-351.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2019.04.007

• 积雪草酸
• 成骨分化
• 小鼠
• 胚胎成骨细胞前体细胞
• 碱性磷酸酶
• 茜素红
• 实时荧光定量PCR
• 蛋白免疫印迹法
• MAPK-AKT
• Ⅰ型胶原蛋白
• 骨形态发生蛋白2
• 转录因子
• 核心结核因子α1
• 骨钙素

目的研究积雪草酸在体外对成骨细胞分化的影响,并初步探讨其作用机制。方法使用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)进行成骨分化相关实验,将积雪草酸作为成骨诱导条件下的附加刺激,用CCK8法检测药物对成骨细胞活力的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)染色评价成骨细胞的早期分化能力;采用茜素红染色观察钙结节的形成数量,评估成骨细胞的矿化能力;用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞标志物的水平;采用蛋白免疫印迹法检测MAPKAKT信号通路及凋亡相关蛋白的表达。结果 1～40μmol·L-1积雪草酸对细胞无毒性作用;随着积雪草酸刺激浓度的增加,ALP和茜素红的染色强度也随之增加。经积雪草酸刺激3 d后,Ⅰ型胶原蛋白基因的表达水平出现明显变化;第7天时,ALP、骨形态发生蛋白2、转录因子、核心结核因子α1和骨钙素的表达水平显著增加。经积雪草酸刺激后,MC3T3-E1细胞内MAK-AKT信号通路激活;同时,抗凋亡蛋白的表达上调,促凋亡蛋白的表达下降。结论积雪草酸以浓度依赖的方式促进成骨细胞分化,抑制成骨细胞凋亡,该效应可能是通过激活MAPK-AKT信号介导。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院; 材料学院; 西南交通大学