水痘-带状疱疹病毒糖蛋白H/L重组真核表达质粒的构建及其免疫效果评价

作者：周旭; 魏文珍; 梁慧颖; 周慧; 李春明^*; 沈红杰

来源：中国生物制品学杂志, 2022, 35(05): 527-531.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003614

• 水痘-带状疱疹病毒
• 糖蛋白H
• 糖蛋白L
• 质粒免疫
• 免疫原性

目的 构建水痘-带状疱疹病毒（varicella zoster virus,VZV）糖蛋白H(glycoprotein H,gH)和糖蛋白L(glyco-p rotein L,gL)重组真核表达质粒，用质粒免疫小鼠，评价其免疫效果。方法 以提取的VZV基因组DNA为模板，PCR扩增gH胞外区基因（g H795）和gL全长基因，与pCI-neo载体连接，构建重组真核表达质粒pCI-neo-VZV-gH795-His和p CI-neo-VZV-gL-His；将质粒单独或与CpG1826佐剂共同免疫小鼠，免疫周期为0、3、5周，采血周期为3、5、7周，检测血清抗体效价、中和效价和膜免疫荧光抗体（fluorescent antibody to membrane antigen,FAMA）效价。结果 重组真核表达质粒pCI-neo-VZV-g H795-His和pCI-neo-VZV-gL-His经双酶切（XbaⅠ/EcoRⅠ）和测序证明构建正确。单质粒免疫小鼠，血清抗体效价较低，双质粒免疫小鼠，血清抗体效价微弱升高，双质粒与佐剂共同免疫小鼠，血清抗体效价达1∶6 000以上，CpG1826对于抗体产生具有较明显的促进作用。仅双质粒与佐剂共免疫组小鼠血清显示出中和活性，免疫后7周，血清中和效价达1∶62。双质粒与佐剂共免疫组免疫后7周小鼠血清FAMA效价为1∶8～1∶16，其余各组均为阴性。结论 gH（或gHgL复合物）具有一定的免疫原性，本实验为其进一步的免疫原性研究奠定了基础。

• 单位
  长春生物制品研究所