盐酸小檗碱对肝星状细胞自噬和凋亡的影响

作者：张建; 赵红伟; 胡义亭; 张大雷; 高俊茶; 郑吉敏; 王玉珍^*

来源：中国现代医学杂志, 2020, 30(05): 19-26.

• 肝纤维化
• 盐酸小檗碱
• 肝星状细胞
• 自噬
• 凋亡

目的研究盐酸小檗碱对肝星状细胞(HSCs)自噬和凋亡的影响。方法取指数生长期HSCLX2细胞,实验分组:溶剂对照组(1‰DMSO)、盐酸小檗碱5μg/ml组、盐酸小檗碱10μg/ml组和盐酸小檗碱20μg/ml组。盐酸小檗碱干预24 h。流式细胞术检测细胞凋亡、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)阳性细胞荧光强度。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Caspase-3、与Bcl-2相互作用的肌球蛋白样卷曲螺旋蛋白1(Beclin1)、自噬相关基因5(Atg5)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)mRNA的表达,Western blotting检测Beclin1、Atg5、Akt、p-Akt、JNK及p-JNK蛋白的表达。结果与溶剂对照组比较,不同盐酸小檗碱浓度干预组HSC-LX2凋亡增加(P <0.05),Caspase-3mRNA表达增加(P <0.05),Caspase-3阳性细胞荧光强度及蛋白活性升高(P <0.05);Beclin1、Atg5 mRNA及蛋白水平下降(P <0.05);Akt、JNK mRNA水平下降(P <0.05),Akt、p-Akt、JNK、p-JNK蛋白水平下降(P <0.05)。结论盐酸小檗碱可能通过抑制Akt信号通路促进凋亡,通过抑制JNK信号传导途径抑制自噬。

• 单位
  河北省人民医院; 河北大学附属医院