基于P72、MGF和CD2v基因的非洲猪瘟三重荧光定量PCR检测方法的建立

作者：张红云; 陈秋英; 严斯刚; 杜泓明; 陆志翔; 郑敏; 罗廷荣^*

来源：广西农学报, 2023, 38(01): 32-39.

DOI：10.3969/j.issn.1003-4374.2023.01.008

• 非洲猪瘟
• 野毒株
• 基因缺失毒株
• 三重荧光定量PCR
• 检测方法

非洲猪瘟在临床上出现多种毒株，主要分为野毒株和基因变异毒株。因其在临床上造成不同程度的危害，有必要建立一种方法进行正确诊断和健康监测。为实现野毒株和基因变异毒株的鉴别诊断，研究根据GenBank中的ASFV中国流行株(登录号：MK333180.1)的P72、CD2v、MGF基因保守序列设计引物，建立一种可以同时检测上述三种基因的三重荧光定量PCR方法。三重荧光定量PCR方法对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒2型(PRV)和猪圆环病毒(PCV2)检测均无交叉反应，表现出较强的特异性。敏感性检测显示针对P72、CD2v和MGF重组质粒标准品的最低检测下限为103～102 copies/mL。在重复性试验中，大部分组间变异系数均小于2%或接近2%，具有较好的重复性。试验表明，三重荧光定量PCR方法可用来鉴别野毒株和基因变异毒株。

• 单位
  广西大学; 广西壮族自治区动物疫病预防控制中心; 广西璞缔恩葳生物技术有限公司