Cx43基因干扰对大鼠星形胶质细胞谷氨酸基础释放的影响

作者：王凌云; 田衍平; 牛建钦; 肖岚

来源：第三军医大学学报, 2012, (08): 701-704.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2012.08.005

• 连接蛋白43
• siRNA
• 星形胶质细胞
• 谷氨酸 connexin 43
• siRNA
• astrocyte
• glutamate

目的构建能有效抑制大鼠星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因表达的siRNA载体,并检测抑制Cx43表达对星形胶质细胞谷氨酸释放的影响。方法合成针对大鼠Cx43基因的siRNA寡核苷酸,构建pGCsi.U6.neo.GFP质粒载体。质粒通过电转方法转染原代星形胶质细胞后,用免疫荧光染色及Western blot检测转染干扰质粒对大鼠ASTs Cx43蛋白表达的影响。用谷氨酸ELISA定量试剂盒检测释放至培养基中谷氨酸的浓度,并用DAPI染色进行细胞计数。结果测序结果显示,Cx43基因的目的片段正确插入载体,并保持正确的读码框。干扰质粒...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学