甲型H1N1流感病毒小鼠肺炎-肠炎模型的建立及验证

作者：杜宝香; 于钦辉; 孙启慧; 王立清; 杨勇^*; 容蓉^*

来源：中国比较医学杂志, 2022, 32(09): 27-33.

• 小鼠
• 模型
• 流感
• 肺炎
• 肠炎

目的 建立稳定的H1N1流感病毒肺炎-肠炎小鼠模型，为胃肠型流感的病理基础及抗病毒药物研究提供工具和手段。方法 BALB/c小鼠随机分为4组(n=6),10倍半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose, 10 TCID50)组、1 TCID50组、0.1 TCID50组和对照组。除对照组外，其他3组小鼠滴鼻感染不同剂量的H1N1流感病毒。感染病毒后，每天测量小鼠的肛温、体重，观察小鼠皮毛及精神状态等，连续7 d。处死后测定小鼠脏器指数、RT-PCR检测肺组织中甲型流感病毒H1N1 M基因及小肠组织中视黄酸受体相关孤儿受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptor, ROR-γt)的mRNA表达量。对筛选出的最佳感染剂量进行实验验证。结果 与对照组小鼠相比，模型组小鼠10 TCID50组和1 TCID50组体重呈显著下降趋势，肺指数明显升高(P<0.01),胸腺指数明显降低(P<0.01、P<0.05),肺部病毒载量及小肠组织中ROR-γt的mRNA表达量显著升高，出现背弓佝偻、精神不振、呼吸急促等现象，两个组的死亡率分别为67%和17%。0.1 TCID50组小鼠指标虽有相似趋势，但无显著性差异。对1 TCID50感染剂量进行实验验证，与对照组相比，病理切片结果显示，模型组小鼠肺及小肠组织出现严重病理损伤，肺组织中白细胞介素2(interleukin-2, IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(interferon-γ, IFN-γ)、白细胞介素17A(IL-17A)及小肠组织中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)和IL-2显著升高，但肠组织中IL-6和白细胞介素33(IL-33)显著降低。结论 1 TCID50病毒感染为建立小鼠肺炎-肠炎模型的最佳浓度，且经过后期多批次的建模实验，证实该模型建立方法稳定、可靠，为抗病毒研究提供良好的病理模型。

• 单位
  山东中医药大学