利用优化DNA质粒制备大鼠CD138单克隆抗体

作者：罗芳芳; 钱峰; 梅芹

来源：生物化工, 2020, 6(06): 42-68.

• 大鼠CD138
• DNA免疫
• 鞭毛蛋白
• pCAGGS
• 佐剂效应

目的:通过优化DNA质粒制备高同源性小鼠抗大鼠CD138抗体。方法:优化DNA质粒转录后调节元件和分子佐剂增强DNA免疫反应。通过将HPRE、WPRE、HTLV-1R转录后调节元件和鞭毛蛋白(FliC)佐剂分别克隆入pCAGGS,获得p CAGGSHPRE、pCAGGS-WPRE、pCAGGS-HTLV-1R和p CAGGS-FliC载体;将luciferase和大鼠CD138基因分别克隆入相应载体,进行体外表达检测;选用3个质粒(pCD138、pHCD138、pFCD138)分别免疫BALB/C小鼠,比较免疫反应强度和抗大鼠CD138抗体数量和质量。结果:与对照组(pCD138)相比,含FliC质粒显著地降低大鼠CD138表达(P <0.05);其他质粒无显著差异(P> 0.05)。含FliC质粒明显提高小鼠免疫反应,其他质粒相对较弱;而且含FliC质粒组动物免疫反应较快,明显缩短免疫周期,获得高质量阳性杂交瘤单克隆抗体。结论:嵌合FliC和大鼠CD138明显提高抗原特异性免疫反应,最终获得两株高亲和力杂交瘤单克隆抗体(35-G11、39-D2)。

• 单位
  复旦大学; 生命科学学院; 上海药明生物技术有限公司