血红素加氧酶-1在纳米氧化锌致人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用

作者：乔亚梅; 梁肖; 路亚柯; 卓来宝; 武佳佳; 王惠欣; 姚武; 燕贞^*

来源：中华预防医学杂志, 2018, 52(11): 1177-1181.

• 血红素加氧酶-1
• 细胞
• 活性氧
• 纳米氧化锌

目的探讨血红素加氧酶(HO-1)对纳米氧化锌(ZnO-NPs)致人脐静脉血管内皮细胞株(EA.hy926细胞)活性氧水平改变的影响。方法取对数生长期EA.hy926细胞,分别采用0.0、2.5、5.0、10.0和15.0 mg/L ZnO-NPs溶液进行染毒,4 h后采用流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,计算平均荧光强度(MFI),24 h后采用Western Blot检测细胞内HO-1蛋白表达水平。将15.0 mg/L浓度的ZnONPs溶液刺激细胞设定为ZnO-NPs组,同时设定空白对照组。另外使用终浓度为10μmol/L的HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPPIx)及HO-1激活剂钴原卟啉(CoPPIx)分别预处理细胞,设置为ZnPPIX、CoPPIx组。以终浓度为10μmol/L的ZnPPIX、CoPPlx预处理EA.hy926细胞1h后,于培养基中加入15.0 mg/L ZnO-NPs进行培养,分别设定为ZnPPIX+ZnO-NPs组、CoPPIx+ZnO-NPds组。各组均于染毒后4 h后检测活性氧水平,计算平均荧光强度(MFI),24 h后检测HO-1表达水平。结果 ZnO-NPs染毒剂量增加,EA.hy926细胞内活性氧与HO-1水平增加(0.0、2.5、5.0、10.0和15.0 mg/L ZnO-NPs染毒组的MFI分别为22 627.22±718.27、24 726.47±568.52、31 141.75±1 312.24、39 824.82±4 774.74、50 569.03±1 497.63,HO-1相对表达量分别为0.16±0.01、0.19±0.02、0.16±0.01、0.23±0.02、0.92±0.06),P值均<0.001。15.0mg/L ZnO-NPs组HO-1灰度值高于ZnPPIx+ZnO-NPs组(1.12±0.01比1.05±0.05,P<0.05),且活性氧MFI水平较低(53 654.53±2 229.01比62 683.95±2 589.59,P<0.001);CoPPIx+ZnO-NPs组HO-1灰度值高于15.0 mg/L ZnO-NPs组(1.74±0.11比0.22±0.03,P<0.001),且活性氧水平较低(32 845.04±993.48比53 654.53±2 229.01,P<0.001)。结论 ZnO-NPs可致EA.hy926细胞发生氧化应激,呈剂量-效应关系,HO-1可调控ZnO-NPs诱发的氧化应激水平。

• 单位
  公共卫生学院; 郑州大学