雷帕霉素诱导自噬对牙髓干细胞体外增殖的影响及其机制研究

作者：何飞; 罗文; 温超颖; 何飞

来源：现代口腔医学杂志, 2022, 36(02): 105-109.

• 牙髓干细胞
• 自噬
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的 探讨雷帕霉素（rapamycin,RAPA）诱导的自噬对人牙髓干细胞（human dental pulp stem cells,hDPSCs）体外增殖的影响。方法 以不同浓度（1 nM,2 nM,5 nM,10 nM,20 nM）RAPA处理hDPSCs,GFP-LC3融合蛋白示踪实验及蛋白免疫印迹法检测hDPSCs自噬活性及自噬相关蛋白表达水平；CCK-8法检测细胞的增殖率变化；流式细胞仪检测细胞周期变化；蛋白免疫印迹法检测细胞增殖及细胞周期相关蛋白表达水平。结果 不同浓度RAPA均可诱导hDPSCs自噬。与对照组相比，诱导组细胞内自噬小体数量显著增多，自噬相关基因5(ATG5)、P62、脂质化轻链蛋白3(LC3-II/I)表达显著增高（P<0.001）。自噬可显著抑制细胞增殖（P<0.001），改变细胞周期时相，G0/G1期细胞比例升高（正常63.5%，实验组83.4%～89.9%），细胞增殖指数显著降低（正常36.5%，实验组16.6%～10.1%），作用与药物浓度呈正相关。与对照组相比，实验组细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、周期素激酶4(CDK4)、周期素激酶6(CDK6)及细胞增殖核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达显著下调（P<0.001）。结论 RAPA诱导的细胞自噬可显著抑制hDPSCs的体外增殖，其作用与细胞周期改变和细胞增殖相关蛋白表达下调有关。

• 单位
  南方科技大学; 暨南大学; 中心实验室; 深圳市人民医院; 北京中医药大学; 第二临床医学院